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干細胞無菌實驗室的制備區(qū)與培養(yǎng)區(qū)如何布局

更新時間：2025-12-09   點擊次數(shù)：221次

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干細胞無菌實驗室制備區(qū)與培養(yǎng)區(qū)布局需遵循 “單向流程、分級隔離、環(huán)境適配、污染阻斷" 核心原則，兼顧干細胞活性維持與無菌防護，實現(xiàn)從細胞制備到培養(yǎng)的閉環(huán)管控，具體布局方案如下：

  1. 整體空間層級與相對位置

    • 兩區(qū)需集中布置在實驗室核心無菌區(qū)域（A/B 級潔凈區(qū)），整體位于非無菌輔助區(qū)的內側、下風側（按 HVAC 氣流走向），與外部區(qū)域用雙層氣密隔斷 + 三級緩沖凈化通道隔離。

    • 按 “制備區(qū)→中轉緩沖→培養(yǎng)區(qū)" 單向線性排布 ，制備區(qū)靠近無菌物料入口，培養(yǎng)區(qū)深入核心無菌區(qū)內側，兩區(qū)直線距離≥3m，且中間設專用中轉緩沖間，杜絕逆向動線。

  2. 制備區(qū)布局要點

    • 整體潔凈等級≥ISO 7 級，局部操作區(qū)達 ISO 5 級；維持 + 10~15Pa 微正壓（相對中轉緩沖間）；配備獨立排風，排出的氣溶膠經(jīng) H14 高效過濾器處理；地面采用無縫抗菌環(huán)氧自流平，墻角做 R50mm 圓弧處理，無衛(wèi)生死角。

    • 功能分區(qū)細化

    • 環(huán)境與設施要求

    1. 原料處理工位：緊鄰無菌物料傳遞窗，用于干細胞原料（臍帶、骨髓等）的無菌拆解、清洗，配備生物安全柜（二級）、無菌操作臺，臺面設 0.22μm 除菌過濾器接口，保障原料初始無菌。

    2. 細胞分離 / 純化工位：與原料處理工位相鄰且單向銜接，配備低溫離心機、流式細胞儀，區(qū)域維持局部垂直單向流（風速 0.36-0.54m/s），溫度控制在 20-25℃，避免溫度波動影響細胞活性。

    3. 試劑配制 / 分裝工位：獨立設置在制備區(qū)邊緣，與細胞操作工位用矮隔斷分隔，配備無菌移液器、分裝儀，試劑經(jīng)雙扉滅菌傳遞窗轉入，且需現(xiàn)配現(xiàn)用，減少污染風險。

  3. 培養(yǎng)區(qū)布局要點

    • 整體潔凈等級≥ISO 7 級，培養(yǎng)箱周邊局部達 ISO 5 級；維持 + 15Pa 微正壓（相對制備區(qū)），確保氣流從培養(yǎng)區(qū)流向制備區(qū)；溫度控制在 22±0.5℃、濕度 45%-60%，避免環(huán)境波動影響細胞貼壁與增殖；配備備用 UPS 電源，保障培養(yǎng)箱斷電后短時溫控穩(wěn)定。